
1 廣西醫(yī)科大學(xué)化學(xué)教研室 2 廣西醫(yī)科大學(xué)病理生理教研室、臨床免疫研究室
(南寧 530021)
摘要 目的:觀察茉莉花茶、綠茶浸出液的免疫調(diào)節(jié)和抑菌效應(yīng)。方法:配制系列濃度的茉莉花茶、綠茶浸出液,觀察其對中性粒細(xì)胞吞噬實驗以及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗的影響以及對多種細(xì)菌增殖的抑制效果。結(jié)果:較高濃度茉莉花茶、綠茶浸出液均可以明顯提高脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,兩者無顯著差異;但對中性粒細(xì)胞吞噬率無明顯影響,對多種細(xì)菌的抑菌圈直徑是6.0mm至13.0mm。結(jié)論:茉莉花茶、綠茶浸出液均有一定的免疫促進(jìn)效應(yīng)和抑菌趨勢。
關(guān)鍵詞:茉莉花茶 綠茶 免疫 抑菌
綠茶是未經(jīng)發(fā)酵處理的山茶屬小葉茶的干燥葉片,是大眾喜愛的保健茶品,在綠茶中加入茉莉花制成的茉莉花茶,因其特有花香味而為眾多的飲茶者喜愛。本實驗采用兩者的浸出液進(jìn)行細(xì)胞免疫和抑菌方面實驗,觀察兩者的生理與生物學(xué)性狀,探討其保健效應(yīng)的可能機(jī)理。
1、材料與方法
1.1 實驗茶葉與浸出液制備:橫縣綠茶與茉莉花茶,由橫縣茶協(xié)會提供。綠茶與茉莉花茶浸出液制備:將10克茶加入100 ml 90℃雙蒸水中浸泡30分鐘,加入0.8克氯化鈉配成等滲原液,0.22 um微孔除菌過濾,收集濾液備用。
1.2實驗動物:25只,SD大鼠200~250克,雄性,BALB/C小鼠25~30克,10只。
1.3實驗分組與檢測指標(biāo)
1.3.1 實驗分組:(1)對照組:在反應(yīng)體系中加入1/5體積生理鹽水。(2)綠茶GPA組與茉莉花茶FPA組:在反應(yīng)體系中對應(yīng)加入1/5體積的綠茶與茉莉花茶原液。(3)綠茶GPB組與茉莉花茶FPB組:在反應(yīng)體系中對應(yīng)加入1/10體積的綠茶與茉莉花茶原液。(4)綠茶GPC組與茉莉花茶FPC組:在反應(yīng)體系中對應(yīng)加入1/20體積的綠茶與茉莉花茶原液。
1.3.2 免疫調(diào)節(jié)實驗:
1.3.2.1 中性粒細(xì)胞吞噬實驗:取SD大鼠腹主動脈抽取抗凝血,采用明膠生理鹽水沉淀法分離血中性白細(xì)胞,調(diào)細(xì)胞濃度為1.0×106/ml,取0.2ml用血漿配置細(xì)胞懸液,加入5ul 滅活金葡菌懸液(1×1010/ml),然后根據(jù)分組按比例加入綠茶與茉莉花茶原液,37℃孵浴30分鐘,取細(xì)胞懸液制片,Wright`s 染色, 油鏡下觀察200個中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌的情況,計算吞噬率,進(jìn)行10個樣本檢測。
1.3.2.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗:取BALB/C小鼠脾,撕碎,采用淋巴細(xì)胞分離液分離和純化脾淋巴細(xì)胞,調(diào)細(xì)胞濃度為1.0×106/ml,在96孔板中每孔加入100 ul細(xì)胞懸液,并按3.1的實驗分組按比例加入綠茶與茉莉花茶原液,在含PHA培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時,取細(xì)胞懸液制片,吉姆薩-瑞氏染色, 油鏡下觀察200個細(xì)胞中轉(zhuǎn)化的淋巴細(xì)胞,計算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。每個實驗組為6個復(fù)孔。
1.3.3 抑菌實驗:實驗抑菌紙試片的制備:取直徑6.0mm的無菌濾紙片,浸入兩種茶液原液中,涼干備用。細(xì)菌選擇:銅綠假單胞 、摩根氏菌、粘質(zhì)沙雷氏菌 、 肺炎克雷伯菌 、金葡(MRSA)、金葡(25923)、溶血性葡萄球菌 。在接種好細(xì)菌后,采用貼濾紙片法觀察抑菌圈,并測定抑菌圈直徑大小。
1.3.4 統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)據(jù)采用t或t` 檢驗進(jìn)行處理。
2 、結(jié)果
2.1 茉莉花茶、綠茶浸出液的免疫調(diào)節(jié)情況:具體見表1。茉莉花茶、綠茶浸出液對中性粒細(xì)胞的吞噬率無明顯的提高,而且兩者在各濃度組之間的差異也無顯著意義。在較高濃度的GPA、GPB、FPA、FPB組中,脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均維持在52.6%~63.2%之間,除FPB外,均明顯高于對照組的40.1%脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,但以上四組間無顯著差異。此外脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率在FPB組有升高趨勢。
2.2 茉莉花茶、綠茶浸出液對中性粒細(xì)胞吞噬率與脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響
(n=10) (n=6)