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      摘要　在照光和黑暗條件下研究了不同濃度的6-BA和GA+6-BA混合劑處理對油茶離體葉片衰老的影響.結(jié)果表明，在光條件下6-BA可以保持葉片細胞的超氧歧化酶(SOD)活性(為對照的129%)，降低了膜脂過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)的積累(為對照的47%)，延緩葉綠素和蛋白質(zhì)的降解.說明6-BA有延緩葉片衰老的作用，在黑暗條件下上述生理指標的水平較低，表明光對6-BA的作用有一定的增益效應(yīng).GA+6-BA混合劑處理沒有明顯效果.
關(guān)鍵詞　6-芐氨基嘌呤；油茶葉片；延緩衰老
中圖分類號　S794.401

Delayed Action of 6-BA on Detached-leaves
Senescence in Camellia oleifera

Hu Zhesen

Resources ＆ Environment Department，F(xiàn)ujian College of Forestry，Nanping，F(xiàn)ujian 353001

ABSTRACT Experiments were carried out to study the effect of different concentration 6-BA solutions and 6-BA-GA mixtures on detached-leaves senescence of Camellia oleifera under illumination and dark，the results indicated that:under illumination，6-BA could maitain the activity of SOD，reduce the accumulation of chlorophyll and protein，therefore，6-BA played delayed action on leaves senescence of Camellia oleifera，The delayed acton of 6-BA on leaves senescence under dark tallied with that under illumination，but the degrees were lower.The 6-BA-GA mixture hardly had evident effect on senescence.
KEY WORDS　Camellia oleifera，leaf，6-benzyladenine，senescence

　　促進油茶產(chǎn)量提高是林業(yè)工作者的緊迫任務(wù)，除了采取集約經(jīng)營的一系列措施外，還必須努力探索其生長發(fā)育的內(nèi)在生理生化機制.油茶葉片是積累干物質(zhì)的源泉，如果能延緩葉片的衰老將會有效地增加產(chǎn)量.衰老被認為是一種氧化過程，是功能的衰退，是體內(nèi)自由基累積導(dǎo)致膜脂脂質(zhì)過氧化的結(jié)果〔1〕.離體葉片衰老容易調(diào)控，試驗周期短.因此采取6-BA、GA等處理油茶離體葉片，然后測定與葉片衰老相關(guān)的超氧歧化酶(SOD)活性，過氧化作用產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量、葉綠素和蛋白質(zhì)含量等生理指標.為延緩油茶生長后期葉片衰老過程達到增產(chǎn)目的提供理論依據(jù).

1　材料與方法
1.1　材料的處理
　　取枝梢下部2～3片成熟葉片為材料，鉆取面積約為1.2cm2圓片，分別漂浮于1mg/L6-BA、5mg/L6-BA　溶液、6-BA+GA　混合液(各為2.5mg/L)和水中.每個處理取70～80個小圓片，各項處理分別光和暗兩種條件下進行，室溫25℃～27℃放置8天，每種處理重復(fù)3次.
1.2　生理生化指標測定
1.2.1　葉綠素含量測定　按Arnnan的方法取處理的圓葉片用95%乙醇研磨提取，濾液用721分光光度計測定光密度值，計算含量〔2〕.
1.2.2　蛋白質(zhì)含量測定　取處理的圓葉片加0.2mol／L磷酸緩沖液(pH6.0)研磨勻漿，離心取上清液加入考馬斯亮蘭溶液于721分光光度計595nm波長處測光密度值，計算含量〔3〕.
1.2.3　SOD活性測定　將處理的圓葉片沖洗干凈吸干后于4℃下加入0.05mol／L磷酸緩沖液(pH7.8)研磨勻漿，10000r／min離心20min，上清液用721分光光度計測定光密度值，計算酶活性，以抑制氮蘭四唑光化還原50%為一個酶單位〔4〕.
1.2.4　MDA含量測定　取處理的圓葉加蒸餾水研磨勻漿，在提取液中加入0.5%硫代巴比妥酸溶液沸水浴中煮沸10min，3000r／min 離心15min，取上清液測532nm和600nm處的光密度，計算過氧化脂質(zhì)含量〔5〕.

1、2、3、4—光處理 1′、2′、3′、4′—暗處理
1，1′—對照2，2′—5mg／L6-BA 3，3′—1mg／L6-BA
4，4′—6-BA+GA(各2.5mg／L)
附圖　不同濃度6-BA處理對油茶葉片各生理指標的影響
FIGURE　Effect of 6-BA with different concentrations on the
physiological indexes of Camellia oleifera leaves

2　試驗結(jié)果
2.1　6-BA對油茶葉片葉綠素含量的影響
　　光照條件下5mg／L和1mg／L6-BA處理的油茶葉片的葉綠素含量分別為對照的115%和133%(經(jīng)方差分析呈顯著差異)，暗條件下上述兩種濃度的6-BA處理的葉片葉綠素含量分別為對照的106%和114%(附圖).說明6-BA處理能維持較高的葉綠素含量，5mg／L6-BA處理的效果更佳，而且光照條件下有增益效應(yīng).
2.2　6-BA對油茶葉片蛋白質(zhì)含量的影響
　　經(jīng)過6-BA處理的油茶葉片蛋白質(zhì)含量比對照的增加較多(附圖).光照條件下以5mg／L和1mg／L6-BA處理的葉片蛋白質(zhì)含量分別相當于對照的154%和120%.暗條件下上述兩種濃度的6-BA處理的葉片蛋白質(zhì)含量分別相當于對照的139%和118%.說明6-BA能有效地延緩葉片中蛋白質(zhì)的降解從而延緩葉片衰老.也可以看出GA+6-BA混合液處理的葉片蛋白質(zhì)含量與對照的無顯著差異.
2.3　6-BA對油茶葉片SOD活性的影響
　　光照條件下以5mg／L和1mg／L6-BA處理的葉片SOD活性分別比對照的高29%和20%.暗條件下經(jīng)上述兩種濃度6-BA處理的葉片SOD活性分別比對照的高18%和13%.說明6-BA能維持葉片SOD活性較高水平，有效地防止葉片衰老.GA+6-BA混合液處理的葉片SOD活性與對照的也無明顯差異(附圖).
2.4　6-BA對油茶葉片MDA含量的影響
　　光照條件下經(jīng)5mg／L和1mg／L6-BA處理的葉片MDA含量分別比對照的低27%和14%.暗條件下經(jīng)上述兩種濃度6-BA處理的葉片MDA含量分別比對照的低的22%和11%.說明6-BA能抑制油茶葉片的膜脂過氧化作用.GA+6-BA混合液處理的葉片MDA含量與對照的也無明顯差異(附圖).

3　結(jié)論與討論
　　油茶葉片的光合色素、可溶性蛋白質(zhì)含量、可以清除活性氧危害的SOD活性的降低和由于膜脂過氧化作用加強MDA含量增加而導(dǎo)致葉片衰老.以6-BA處理葉片可以明顯影響這些生理過程.MDA的積累比對照少，SOD活性維持在較高水平，明顯加強了細胞內(nèi)清除自由基的能力，抑制膜脂的過氧化作用.Dhindsa等也發(fā)現(xiàn)激動素對燕麥葉片片段有防止MDA增加的作用〔6〕.可見細胞分裂素是通過影響蛋白質(zhì)、類脂、色素等一系列代謝過程延緩葉片衰老的，以6-BA+GA混合液處理葉片對其生理過程無明顯影響.
　　本試驗結(jié)果，6-BA溶液的光照條件下處理葉片比暗條件下處理具有比較顯著的效果.說明光對激素的作用有增益效應(yīng).表明以6-BA和GA等調(diào)節(jié)葉片衰老過程的效果可能因外界條件的差異而有所不同.
　　加入外源細胞分裂素可以延緩油茶葉片的衰老，延長光合器官的功能增加干物質(zhì)，因此在林業(yè)生產(chǎn)實踐上也具有參考價值.

*福建省教委科學(xué)基金資助項目

作者簡介：胡哲森，男，1950年10月出生，副教授。

作者單位：福建林學(xué)院資源與環(huán)境系　南平353001

參考文獻
　1　林植芳等.水稻葉片的衰老；超氧物歧化酶及膜脂過氧化的變化.植物學(xué)報，1984，26(6)：605～615
　2　華東師范大學(xué)生物系植物生理教研室主編.植物生理學(xué)實驗指導(dǎo).北京：人民教育出版社，1980.68～166
　3　李琳等.應(yīng)用蛋白染色劑考馬斯蘭G—250測定蛋白質(zhì)的方法.植物生理學(xué)通訊，1980，(6)：52～55
　4　黃學(xué)林等編.種子生理實驗手冊.北京：農(nóng)業(yè)出版社，1990.127～130
　5　朱廣廉等編.植物生理學(xué)實驗.北京：北京大學(xué)出版社1990.245～248
　6　Dhindsa R S，Plumb-Dhindsa P L and D M Reis.Leaf senescence and lipid peroxidation:Effect of some phytohormones and scarengers of free redicals and singler oxygen.Plant Physiol，1982，56:453～457