[目的]為建立油茶RAPD分析的最佳反應(yīng)體系。[方法]分別用改良SDS法和CTAB法從12個(gè)油茶品種的新鮮幼葉中提取基因組DNA。通過(guò)測(cè)定OD260和OD280來(lái)比較兩種方法提取DNA的純度。建立油茶的RAPD反應(yīng)程序，通過(guò)優(yōu)化反應(yīng)條件獲得油茶RAPD分析的最佳反應(yīng)體系。[結(jié)果]CTAB法提取的油茶基因組DNA純度高于SDS法。油茶RAPD分析的最佳反應(yīng)體系為：1．0UTaqDNA聚合酶、1．5mmol／LMgCl2、200p．mol／LdNTP、10pmol／L隨機(jī)引物、20ngDNA模板、2μl10×PCR buffer，加重蒸水至20出。油茶的RAPD反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性3min；94℃變性1min，40℃退火1min，72℃延伸2min，40循環(huán)；72℃延伸7min。[結(jié)論]該研究所用DNA純度較高，反應(yīng)條件控制嚴(yán)格，試驗(yàn)中擴(kuò)增穩(wěn)定性較好，是適合油茶RAPD分析的最佳反應(yīng)體系。
完成機(jī)構(gòu)：南昌理工學(xué)院生環(huán)系,江西南昌330013
