采用MTT法、Comet assay（彗星實(shí)驗(yàn)）和RT—PCR法研究了表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）對(duì)DNA損傷劑卡莫司汀作用后張氏肝細(xì)胞的DNA損傷及相關(guān)修復(fù)基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明：EGCG能阻止卡莫司汀所致張氏肝細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制，卡莫司汀單用對(duì)張氏肝細(xì)胞的IC50為43．31μg／mL，當(dāng)用25μg／mL和50μg／mL的EGCG與卡莫司汀聯(lián)用時(shí)，對(duì)張氏肝細(xì)胞的IC50分別提高至52．46μg／mL和46．65μg／mL。彗星分析結(jié)果表明，EGCG還能減小卡莫司汀引起的張氏肝細(xì)胞DNA損傷，彗星Olive尾矩值由單用時(shí)的9．07±5．48降為聯(lián)用時(shí)的6．02±2．46。EGCG還能使卡莫司汀所致張氏肝細(xì)胞的DNA修復(fù)基因mgmt和alkb的表達(dá)下降得到回升，卡莫司?。?0μg／mL）處理張氏肝細(xì)胞24h后，mgmt和alkb的mRNA水平（與外參0634-actin的比值）比未處理組明顯下降（分別由0．451±0．041和0．356±0．120下降至0．323±0．046和0．046±0．017，p〈0．05或p〈0．01），當(dāng)EGCG與卡莫司汀聯(lián)合處理24h后，二者的mRNA水平基本恢復(fù)到正常（p〉0．05），與外參β-actin的比值分別為0．451±0．041和0．451±0．041。說(shuō)明EGCG能保護(hù)卡莫司汀對(duì)正常肝細(xì)胞的DNA損傷，因?yàn)樗苣孓D(zhuǎn)卡莫司汀所致正常肝細(xì)胞內(nèi)DNA修復(fù)酶基因mgmt和alkb的表達(dá)下降。
完成機(jī)構(gòu)：[1]電子科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,610051 [2]成都恩威集團(tuán)四川恩威中醫(yī)藥研究開發(fā)有限公司藥理室
