目的:闡明油茶皂苷(SQS)所產(chǎn)生心肌保護(hù)作用與AE3蛋白的基因表達(dá)關(guān)系,方法:采用RNAi技術(shù),在心肌細(xì)胞水平上建立AE3蛋白低表達(dá)、同時(shí)建立缺氧/復(fù)氧損傷(A/R)模型及SQS預(yù)適應(yīng)模型;通過(guò)測(cè)定,心肌細(xì)胞的博動(dòng)頻律、細(xì)胞生存率以及細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH的變化;同時(shí)檢測(cè)心肌細(xì)胞中AE3 mRNA、AE3蛋白的表達(dá)變化,結(jié)果:SQS預(yù)處理能明顯提高A/R損傷后細(xì)胞存活率,減少LDH的漏出,AE3 mRNA、AE3蛋白表達(dá)明顯上調(diào),與A/R組相比均有顯著性差異(均P〈0.01);結(jié)論:在心肌細(xì)胞中轉(zhuǎn)導(dǎo)入三段有AE3基因序列特異性的dsRNA后,可引起AE3 mRNA及蛋白低表達(dá),同時(shí)取消SQS預(yù)處理的心肌保護(hù)作用.為其進(jìn)一步的新藥開(kāi)發(fā)提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù).
完成機(jī)構(gòu):[1]宜春學(xué)院醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室,江西宜春336000 [2]江西醫(yī)學(xué)院藥理教研室,江西南昌330000