山茶屬(CamilliaLinn.)植物屬于山茶科(Theaceae)，是山茶科中最大的一個(gè)屬。有280種，主要分布于熱帶和亞熱帶。我國(guó)有250種以上，主要分布于西南至東南部，集中分布于嶺南地區(qū)[。藥用收載的有山茶(C.japonicaL.)的花(山茶花)，油茶(C.oleiferaAbe1)的種子(茶子心)，油茶種子的脂肪油(茶油)，油茶榨去脂肪油的殘?jiān)?茶子餅)，茶(C.sinensis0.Ktze)的嫩葉(茶葉)，果實(shí)(茶子)和根(茶樹(shù)根)，普洱茶(C.sinensis0.Ktze.Var.as—samicaKitamura)的葉(普洱茶)及皋蘆(C.sinensis0KtzeVar.macrophyllasieb.)的葉(皋蘆)。其中茶油被中華人民共和國(guó)藥典所收載。
到目前為止除了茶和山茶外，其他山茶屬植物藥用價(jià)值研究甚少。人類學(xué)家已對(duì)山茶屬植物進(jìn)行過(guò)分類、9-3類和多次修正。中山大學(xué)張宏達(dá)教授將山茶屬植物分為4個(gè)亞屬，22組，280個(gè)原種[。但由于山茶屬植物種類繁多，給分類、歸類帶來(lái)諸多困難。到目前為止，爭(zhēng)議仍很大。此前的專家認(rèn)為按照花的顏色籠統(tǒng)地分為三大類，即紅花山茶、白花山茶和黃花山茶，由于黃花山茶的研究剛剛起步.本文只對(duì)紅花山茶、白花山茶作如下研究。
1紅花山茶的研究
紅花山茶約有50余種分布于4個(gè)組.目前共采集到南山茶(C.semiserrataChi)、廣寧油茶(C.pitardiiCoh.st)和怒江山茶(C.saluenensisstapfexBean)。它們都屬于山茶亞屬紅山茶組。目前南山茶的研究已取得最新進(jìn)展。南山茶主要分布于廣東西南部和廣西的東南部，是具有明顯主干的小喬木。葉片漂亮，閃閃發(fā)光，葉脈凹陷，花朵碩大，紅色。蒴果卵球形，較大，長(zhǎng)6.0—8.0cm，直徑4.0～7.0cm，是一種重要的油料樹(shù)種，含油量20.5%29.4%，油分質(zhì)量好。其藥理活性和化學(xué)成分未見(jiàn)研究報(bào)道。我們的研究發(fā)現(xiàn)，南山茶種子具有非常強(qiáng)的抗骨質(zhì)疏松作用。
1.1物質(zhì)基礎(chǔ)的研究：前期的藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，南山茶種子的95%乙醇提取物對(duì)維甲酸所致骨質(zhì)疏松大鼠有較強(qiáng)的抗骨質(zhì)疏松活性。在此基礎(chǔ)上，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水對(duì)乙醇提取物進(jìn)行萃取，利用重組人雌激素基因酵母的方法檢測(cè)以上四個(gè)梯度極性部位的雌激素活性，明確了雌激素活性主要集中在乙酸乙酯層，其次為正丁醇層。在明確了抗骨質(zhì)疏松有效組分的基礎(chǔ)上，采用各種色譜方法，如硅膠柱層析色譜、硅膠制備薄層層析色譜、SephadexLH一20凝膠柱層析色譜、高效液相色譜等.對(duì)95%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇層的化學(xué)成分進(jìn)行了分離，共得到14個(gè)單體化合物。通過(guò)理化常數(shù)、波譜解析等方法鑒定了其中12個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)。隨后利用重組人雌激素酵母檢測(cè)了化合物的雌激素活性，確認(rèn)黃酮類化合物為南山茶種子抗骨質(zhì)疏松的有效成分。
1.2藥效及作用機(jī)制的研究：在維甲酸造成的大鼠實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，南山茶種子中的黃酮類成分具有雌激素樣抗骨質(zhì)疏松作用?？墒寡邂}含量明顯增加，明顯提高模型大鼠血清堿性磷酸酶水平、降低抗酒石酸酸性磷酸酶水平。松質(zhì)骨鏡下檢查可見(jiàn)成骨細(xì)胞明顯增多，破骨細(xì)胞明顯減少，說(shuō)明其對(duì)骨吸收有明顯抑制作用。對(duì)骨形成有明顯促進(jìn)作用;明顯提高股骨重量/長(zhǎng)度(G/L)比值，增加骨密度，同時(shí)股骨無(wú)機(jī)物及鈣含量有一定提高趨勢(shì)，使骨小梁明顯向正常水平轉(zhuǎn)化，表明對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松有明顯的預(yù)防和治療作用。
采用重組人雌激素受體基因酵母法對(duì)南山茶抗骨質(zhì)疏松有效部位的研究證明，其黃酮類化合物可與雌激素受體結(jié)合，表現(xiàn)雙向調(diào)節(jié)作用。具有明顯雌激素活性的同時(shí)又有較強(qiáng)的抗雌激素活性。同時(shí)用重組人孕激素受體基因酵母法對(duì)其抗孕激素作用的研究中還發(fā)現(xiàn)，其有效部位表現(xiàn)出明顯的拮抗孕激素效應(yīng)。因孕激素受體能降低雌激素受體(ER)的轉(zhuǎn)錄活性.也就是說(shuō)抑制孕激素受體活性能夠增強(qiáng)體內(nèi)雌激素受體的表達(dá)。
作用機(jī)制：①通過(guò)活化ER促進(jìn)骨細(xì)胞增殖。實(shí)驗(yàn)研究證明。雌激素缺乏是絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松(PMOP)的首要病因。PMOP為高轉(zhuǎn)換型的骨質(zhì)疏松癥.稱原發(fā)I型?，F(xiàn)已證明人類成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞中有ER，植物雌激素可通過(guò)對(duì)骨的靶細(xì)胞直接作用而發(fā)揮對(duì)骨的調(diào)節(jié)作用：②通過(guò)拮抗孕激素活性提高ER的轉(zhuǎn)錄和表達(dá);③通過(guò)增加成骨細(xì)胞堿性磷酸酶活性，促進(jìn)骨礦化。堿性磷酸酶是成骨細(xì)胞分化的一個(gè)早期指標(biāo)，可識(shí)別及評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞的分化程度.其表達(dá)隨著細(xì)胞分化的發(fā)展而增強(qiáng)，是骨形成必需的酶。堿性磷酸酶可分解有機(jī)磷酸釋放無(wú)機(jī)磷，增加局部無(wú)機(jī)磷的濃度，促進(jìn)礦化，其活性升高可為細(xì)胞間質(zhì)含量做好準(zhǔn)備，并且是啟動(dòng)礦化的必備條件。1-3構(gòu)效關(guān)系的研究：目前從植物中發(fā)現(xiàn)的選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，按照化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為8類。其中的苯并吡喃類，因結(jié)構(gòu)母核與1713一雌二醇、己烯雌酚和生育素(VE)相似而具有雌激素活性。黃酮類化合物都具有苯并吡喃基本母核，這是南山茶種子中黃酮類化合物具有雌激素活性的重要原因之一。
除此之外，從構(gòu)效關(guān)系上來(lái)看，南山茶種子中的黃酮類化合物的雌激素活性還有兩個(gè)主要特點(diǎn)：①糖上的乙?；蕉?，活性越強(qiáng)。在濃度0.05g/L時(shí)，5個(gè)乙酰基、4個(gè)乙酰基、3個(gè)乙酰基、單乙酰基(苷元)的誘導(dǎo)率依次為159.9%、119.7%、114.2%、81-4%：②B環(huán)上的酚羥基越多活性越強(qiáng)。木犀草素為5，7，3，4一四羥基，而山柰酚為3，5，7，4一四羥基..當(dāng)濃度O.O1g/L時(shí)，木犀草素的誘導(dǎo)率是87.33%，而山柰酚是39.90%。
2白花山茶的研究
白花山茶是種類最多的一類山茶屬植物，近90種，分布于l2個(gè)組。其中油茶是山茶屬植物中分布最廣、產(chǎn)量最大、資源最豐富的一個(gè)品種，廣布于長(zhǎng)江以南。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)中國(guó)有油茶面積366萬(wàn)公頃.僅廣西就有600萬(wàn)畝。它隸屬于山茶亞屬油茶組該組通常為白花，略芳香，種子含油量高，是重要的油料作物。因?yàn)榉植嫉脑?，?guó)外對(duì)油茶的研究甚少，而國(guó)內(nèi)主要是對(duì)茶油的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和茶麩用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)清塘消毒的研究。化學(xué)研究?jī)H見(jiàn)到對(duì)黃酮類化合物的分離鑒定，未見(jiàn)到皂苷類單體的分離報(bào)道。我們對(duì)油茶的研究取得了突破性進(jìn)展，獲得了創(chuàng)新性成果。如前所述，對(duì)紅花山茶南山茶的研究發(fā)現(xiàn)抗骨質(zhì)疏松的有效成分是黃酮類化合物，而對(duì)油茶的研究發(fā)現(xiàn)其種子(油粕)具有非常強(qiáng)的抗腫瘤、抗殺軟體動(dòng)物、體外殺精子(陰道抗生育)、抗真菌、抗病毒、抗寄生蟲作用，其有效部位皂苷類成分，稱油茶皂素。故此，我們采用正交試驗(yàn)對(duì)其提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選，并采用D101大孔樹(shù)脂對(duì)其進(jìn)行了富集，同時(shí)通過(guò)D941大孔樹(shù)脂進(jìn)行脫色。得到油茶皂苷含量>95%的制備工藝。目前已從油茶皂素中分離了13個(gè)單體皂苷。
3小結(jié)
黃花山茶由于發(fā)現(xiàn)的晚，且分布特殊，所以幾乎未見(jiàn)任何研究。金花茶組植物原種集中分布在中國(guó)廣西壯族自治區(qū)的西南部以及廣西壯族自治區(qū)與越南接壤的區(qū)域。另外，貴州西南部和云南東南部與廣西壯族自治區(qū)接壤的區(qū)域也有少量分布。現(xiàn)已采集到8個(gè)品種即顯脈金花(C.euphlebiaMerr.exSealy)、金花茶(C.nitidissimaChi)、凹脈金花茶(eimpressinrvischangetS.Y.Liang)、毛瓣金花茶(C.pubipetalaWangetHuang)、毛籽金花茶(C.ptilospertlza S.Y.LiangetQ.D.chen)、落葉金花茶(C.Chrysan—thoideschang)、中東金花茶(C.achrysamthachangets.Y.Liang)和夏石金花茶(C.xiashiensiss.Y.LiangetC.Z.Deng)。對(duì)它的研究目前正在展開(kāi)。
我們對(duì)山茶屬植物的研究.雖然取得了一定進(jìn)展，但還是剛剛開(kāi)始。為了使山茶屬植物的研究更加深入，使我們的研究能在國(guó)際山茶屬植物研究領(lǐng)域占一席之地、獲得自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，我們還將進(jìn)行更廣泛的深入研究。
